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鱼类淋巴囊肿病症状及防治:最早发现的鱼类病毒病——慢性皮肤瘤

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鱼类淋巴囊肿病是由 淋巴囊肿病毒 (LCDV)感染引起鱼类的一种 典型的皮肤和浅表组织慢性病 ,它是 最早发现 的鱼类病毒性疾病。该病的 普遍症状 是病鱼体表长有 瘤状物 ,严重时内脏组织器官也出现病变。鱼类淋巴囊肿病的较大规模流行 最先发生 在欧洲的牙鲆养殖场,随后在南美和北美的养鱼场中均暴发过;近年来开始在亚洲流行。

患病芽鲆淋巴囊肿(钟妮娜)

我国在 1992年 养殖的云纹石斑鱼中首次发现了淋巴囊肿病。1997年山东威海地区的牙鲆养殖场大面积暴发了淋巴囊肿病。该病通常 不具有 致死性,但是病鱼体质瘦弱、生长迟缓、 外表异样 而失去商品价值,给水产养殖业带来巨大的经济损失。

1.病原病因

病原是淋巴囊肿病毒,病因是由淋巴囊肿 病毒侵入 导致患病。淋巴囊肿病毒,属 虹彩病毒 科(病毒经过 提纯结晶 后,在斜射光线照射下呈现 蓝紫色的虹彩 光泽,故被命名为虹彩病毒)。病毒粒子二十面体,其轮廓呈六角形,有囊膜,囊膜厚约50~70nm。大小视宿主而不同, 病毒核心 是缠绕在一起的DNA 纤丝团,有可辨认的 衣壳 。在18至20℃的水中5天,冰冻干燥后在上述温度下150天及在零下20℃下两年后 感染力 均未丧失。能用甘油和乙醚 灭活 。病毒能在BF-2、LBF-1、GF-1、SP-1、SP-2 等细胞系上 复制 ,引起细胞出现巨型囊肿细胞,且在边缘有 嗜碱性 胞浆包涵体, 生长温度 20~30℃, 适宜温度 为23~25℃。

患病鲈鱼尾部、鳍条与皮肤上出现囊肿物(仿Leong Tak Seng)

淋巴囊肿病可在多种海水鱼、淡水鱼中发生, 发病率 高达80%。感染可经由 皮肤磨损 处发生,在淋巴囊肿 破裂或剥落 后,病毒即可散出。

2.流行情况

淋巴囊肿病 流行很广 ,在全球范围内均有发生,100多种海水、淡水鱼类均能患病,主要危害 海水鱼 类,特别是鲈形目、鲽形目、鲀形目鱼类 苗种 阶段和1龄鱼种,发病后2个月死亡率达30%以上, 2龄以上的鱼 很少出现死亡,但病鱼 外表难看 失去商品价值。该病 一年四季 都可发生。

患病牙鲆背部形成大量囊肿物(仿江育林)

淋巴囊肿病是一种 非急性病 ,对寄主的影响小引起死亡少。 成熟 的淋巴囊肿细胞破裂后释放病毒,通过水、鳃及损伤的皮肤、鳍入侵,也可经口感染, 高密度养殖和外伤 会增加感染几率。淋巴囊肿病的发生与养殖水温无密切关系,而与苗种本身的体质、携带病毒及病毒的积累程度有关,在 低密度和良好养殖条 件下一般不会引起大量的死亡。 网箱和室内水泥池 工厂化养殖的感染率可高达90%以上, 池塘 养殖的感染率为20%~30%。一般皮肤擦伤或寄生虫机械损伤的 伤口 ,往往成为病毒侵入的门户。

发病芽鲆

3.症状及病理变化

患病鱼类的口唇部、躯干皮肤、鳍及尾部可见单个或成群的 鱼卵状 或 念珠状 物水泡状肿胀物,尤其在背鳍、尾鳍处较多。大小不一,大的有如枣或核桃大。 病灶的颜色 由白色、淡灰色至粉红色,成熟的肿胀物可轻微出血。发病鱼在病情较轻时,行为摄食基本正常,但生长缓慢;病情严重时其食欲下降,甚至不摄食,并发生死亡。在病鱼的 皮肤、鳍和尾部 等处也会出现许多分散或聚集成团的大小不等的水泡状囊肿物,偶尔在 鳃丝、咽喉、肌肉、肠壁、肠系膜、围心膜、腹膜、肝、脾 等组织器官上也有发生。 水泡状的囊胀物 是鱼的真皮结缔组织中的成纤维细胞被病毒感染后 肥大而成 ,并在胞浆内可见大量的 包涵体和病毒颗粒 。

(牙鲆发病)

淋巴囊肿病是一种 慢性皮肤瘤 ,从外观上看近似于体表 乳头状 肿瘤。 感染率 达30%,病鱼的囊肿物多呈 白色、淡灰色、灰黄色 ,有的带有 出血灶 而显粉红色部分感染的鱼体表囊肿物脱落,恢复正常并可在一定时间内具有 免疫力 。有的在 口唇 部影响进食的病鱼则需外科手术摘除,有的病鱼的囊肿可以 自行脱落 , 病症轻 的牙鲆摄食正常且有 自愈 现象。自愈大都发生在牙鲆大批发病的2~3个月之后,但 自愈牙鲆 体质弱,在 运输过程中的死亡 率可以超过80%,失去了商品价值。患病个体生长缓慢,体形消瘦, 一是因为 淋巴囊肿瘤状物对病鱼的呼吸与运动造成了障碍而影响了摄食, 二是因为 随着病毒侵入内脏器官,尤其是心脏与肾脏功能的降低而导致体质恶化。

4.诊断方法

从外观症状及病理变化肉眼见有瘤状物,即可基本作出初诊。但 发病初期 可能会与小瓜虫病、孢子虫病的胞囊容易 混淆 ,后两者可在显微镜下检出 胞囊内活动的虫体 。

患病鱼体表出现大量囊肿物(仿D.W.Bruno)

确诊 可用BF-2、LBF-1等细胞株分离培养病毒,通过电镜观察到病毒粒子。Nishida(1998)用ELISA检测牙鲆抗LCDV抗体,建立了LCDV的ELISA检测方法;战文斌(2007)用抗LCDV单克隆抗体对牙鲆组织中的LCDV进行间接免疫荧光检测,建立了LCDV的免疫荧光检测方法。

囊肿物压片见细胞内包涵体(仿R.Herbert)

病理组织切片 :超薄切片用电镜观察,可见淋巴囊肿细胞内有大量20面体的病毒颗粒。具有厚的透明囊,在细胞中央有1个大核和核仁,胞浆内有多个 嗜碱性包涵体 ;开始老化的淋巴囊肿细胞可能 缺乏核及包涵体 ,但大量的嗜酸性胞浆是 同质 的。囊肿细胞在切片组织中相互挤压、呈不规则形;细胞和细胞核肥大化,细胞体积约为正常的100倍。直径可达100μm,有时可达1mm;细胞质内有许多嗜碱性、具网状结构、形状不规则的大型 包涵体 。

5.预防措施

1、鱼池进行彻底清塘消毒。

2、引进亲本、苗种应严格检疫,发现携带病原者,应彻底销毁。

3、发现病鱼及时捞出。

4、用20毫克每升聚维酮碘溶液浸浴5-10分钟。

5、有研究发现,使用中草药制剂对淋巴囊肿病毒进行预防和治疗,治愈率达80%,用于预防发病率低于10%的鱼群。Yoshimizu等研制出LCDV灭活疫苗,并证实其对牙鲆有保护作用,但是该制备方法不适合规模化生产。

6.治疗方法

1、每公斤体重用聚维酮碘(或者蛋氨氨酸碘)10毫克拌入饵料中投喂,每日1次,连续投喂5-7天。

2、每公斤体重用氟苯尼考60-80毫克,配合适量多种维生素拌料投喂,每日1次,连续投喂5-7天。

3、将病鱼囊肿割除(囊肿在量少和轻度时),并用浓度为每立方米水300毫升福尔马林浸浴30~60分钟。

4、市售过氧化氢(双氧水、H2O2)(30%浓度)稀释至3%,以此为母液,配成50毫克/升的浓度浸洗20分钟,然后将鱼放入22-25℃水温饲养一段时间后,淋巴囊肿会自行脱落,效果显著。

5、投喂抗生素药饵,每公斤饲料拌氟哌酸50~100mg或土霉素1~2g,连续投喂5~10天,可防止继发性细菌感染。

6、施用现行市售的纳米银、头孢、蛋氨酸碘等新型抗杀病毒药物。

7、本病应以防为主。受染病鱼多为无良法治疗,但皮肤患处的囊胀物有时也会自行脱落而痊愈。

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