一种防治老年痴呆的中药组合物及其制备方法和应用的制作方法 【专利摘要】本发明公开了一种防治老年痴呆的中药组合物，包括以下组分且各组分的重量份数为：何首乌15-25份；天麻15-25份；当归8-15份；赤芍8-15份。本发明同时公开了所述的中药组合物的制备方法和应用。本发明所述的防治老年痴呆的中药组合物中，各组分相互配伍后，产生协同作用，对老年痴呆的治疗作用有明显的提高，疗效好，且生产成本低。 【专利说明】一种防治老年痴呆的中药组合物及其制备方法和应用 【技术领域】 [0001 ] 本发明涉及一种中药组合物，尤其是涉及一种防治老年痴呆的中药组合物及其制备方法和应用，属于中药【技术领域】。 【背景技术】 [0002]老年痴呆包括阿尔茨默病和血管性痴呆等类型，是发生在老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病，即在没有意识障碍的状态下，记忆，思维，分析判断，视空间辨认、情绪等方面的障碍。随着人口老龄化的加速，老年痴呆症已成为全球最大的卫生问题之一，也是各国面临的重大疾病负担和公共卫生难题。2011年，全球有约3650万人患有痴呆症，我国有患者800万，是患者人数最多的国家。全球疾病负担评估指出，60岁及以上老年人残疾人数11.2%由老年痴呆引起，高于中风(9.5%)、肌肉骨骼疾病(8.9%)、心血管病(5.0%)。与其他国家一样，老年痴呆已给我国社会、家庭及个人带来了沉重负担。临床上，老年痴呆症的治疗主要是应用乙酰胆碱酯酶抑制剂及免疫炎症、抗氧化剂等对症治疗药物，以缓解症状，但尚无特效治疗或逆转疾病进展的药物。 【发明内容】 [0003]本发明所要解决的技术问题是，提供一种生产成本低、疗效显著的防治老年痴呆的中药组合物及其制备方法和应用。 [0004]为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为: 一种防治老年痴呆的中药组合物，其特征在于，包括以下组分且各组分的重量份数为: 何首乌15-25份； 天麻15-25份； 当归8-15份； 赤芍8-15份。 [0005]优选，所述的一种防治老年痴呆的中药组合物，包括以下组分且各组分的重量份数为: 何首乌17-20份； 天麻17-20份； 当归10-12份； 赤芍10-12份。 [0006]一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)提取:将何首乌、天麻、当归、赤芍按照重量份数比称取后，将原料切片或粉碎，然后洗净，向原料中加入溶剂，所述的溶剂的加入体积与原料总质量的比值为(5?12):1，优选6:1，然后通过加热回流提取，提取次数为I?3次，优选2次，合并提取液； (2)制备中药组合物:将步骤(I)得到的提取液在60?75°C的温度条件下减压蒸馏回收溶剂，优选70°C，并将提取液浓缩至浸膏状态，所述的浸膏的相对密度为1.1?1.3，然后将浸膏在65?75°C的温度条件下减压干燥，优选为70°C，然后粉碎过40?100目筛后得到中药组合物，优选过80目筛。 [0007]进一步，步骤(I)中所述的溶剂为水或乙醇，为了更大程度的保证有效成分的提取率，溶剂优选为乙醇。 [0008]且所述的乙醇的浓度为50?95%，优选80%。 [0009]上述的中药组合物用于制备防治老年痴呆的药物， 且所述的用于制备防治老年痴呆的药物，还包括辅料，此外，所述的药物的剂型为丸齐IJ、片剂、胶囊剂中的任一种。 [0010]本发明的有益效果为:本发明所述的防治老年痴呆的中药组合物中，何首乌可提高机体免疫功能，延缓衰老，降血脂，抗动脉粥样硬化，保肝；天麻增智、抗老年痴呆、抗惊厥、镇静、镇痛；当归抗老防老、除自由基、抗炎、抗血栓、促进造血，而赤芍则清热凉血、散瘀止痛、抗凝和抗血栓、抗动脉粥样硬化、保护心脏和肝脏。上述组分相互配伍后，产生协同作用，对老年痴呆的治疗作用有明显的提高，疗效好，且生产成本低。 【具体实施方式】 [0011]下面结合具体实施例为本发明进行详细的说明。 [0012]实施例1 取何首乌180g、天麻180g、当归110g、赤芍IlOg组成，分别加80%乙醇3.5L加热回流提取2次，每次2小时，合并提取液；提取液于70°C减压蒸馏，回收溶剂，将提取液浓缩至相对密度为1.2的浸膏；浸膏于70°C减压干燥，粉碎成过80目筛的粉末，得药材提取物58g ；取药材提取物加入适当的辅料，按常规工艺制成丸剂、片剂、胶囊剂。 [0013]实施例2 取何首乌150g、天麻150g、当归80g、赤芍80g组成，分别加水4.6L加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液；提取液于70°C减压蒸馏，回收溶剂，将提取液浓缩至相对密度为1.3的浸膏；浸膏于75°C减压干燥，粉碎成过60目筛的粉末，得药材提取物36g ;取药材提取物加入适当的辅料，按常规工艺制成丸剂、片剂、胶囊剂。 [0014]实施例3、 取何首乌180g、天麻150g、当归80g、赤芍IlOg组成，分别加50%乙醇3.5L加热回流提取2次，每次2小时，合并提取液；提取液于60°C减压蒸馏，回收溶剂，将提取液浓缩至相对密度为1.1的浸膏；浸膏于70°C减压干燥，粉碎成过70目筛的粉末，得药材提取物54g ；取药材提取物加入适当的辅料，按常规工艺制成丸剂、片剂、胶囊剂。 [0015]七、药理实验 I材料 1.1试剂 MEM粉末(Gibco公司)，F12粉末(Gibco公司)，胎牛血清(Gibco公司)，A β 25-35 (Sigma公司)，噻唑蓝(MTT) (Amresco日初分装)，DMS0(国药公司)，青霉素(H初生物公司)，链霉素(日初生物公司)，胰蛋白酶(1:250)(日初生物公司)，药材提取物(自制)，东莨菪碱(美国Sigma公司)，石杉碱甲(美国Sigma公司)，。 [0016]1.2 仪器 避暗实验视频分析系统(上海吉量公司)，Y迷宫(上海吉量公司)。 [0017]1.3 细胞 SH-SY5Y细胞株(购自美国ATCC公司)。 [0018]1.4 动物 ICR小鼠(购自上海斯莱克实验动物中心)，雄性，18-22g，在22±2°C环境下适应性喂养三天，12h光照和12h黑夜循环，自由饮食。 [0019]2 方法 2.1试剂配制方法 2.1.1 A β 25-35配制方法 I mg A β 25-35 + 38 μ? 100% DMSO + 905 μ? ddH20 — I mmol/L ;37°C孵育 48 小时，100 μ?/管分装于Eppendorf管中-20°C备用，临用前用水稀释成100 Mmol/L。 [0020]2.1.2药材提取物配制方法 2.1.2.1体外实验用药材提取物配制 化合物粉末用超净水溶解成10-2 mol/L,10 μ?/管分装后存放于_20°C。临用前稀释。 [0021]2.1.2.2体内实验用药材提取物配制 化合物粉末用双蒸水分别溶解成2.5 mg/mL,5 mg/mL和10 mg/mL。 [0022]2.1.3东莨菪碱配制方法化合物粉末用双蒸水溶解成0.45 mg/mL。 [0023]2.1.4石杉碱甲配制方法 化合物粉末用0.1N HCL助溶，溶解后加水配成剂量为10 mg/ml备用，临用前稀释。 [0024]2.2 A β 25-35诱导细胞损伤实验 2.2.1实验分组 正常组:不加任何处理因素；模型组:Αβ 25-35处理细胞24 h ;药材提取物保护组:取I umol/L和10 umol/L两个浓度的药材提取物预处理2 h后加入A β 25-35共同孵育24 h。 [0025]2.2.2细胞培养 SH-SY5Y细胞株完全培养液为MEM/F12+10 %胎牛血清+青链霉素，5 % C02、37°C培养箱中培养，每2-3d传代I次。倒置显微镜观察细胞生长情况。 [0026]2.2.3 A β 25-35 诱导 SH-SY5Y 细胞损伤实验[4] SH-SY5Y细胞以2X 105 cells/mL密度接种于96孔板，放置于5%C02培养箱培养24h后更换培养液，在给药组中加入相应浓度的待测化合物(10 μ?/well)，正常对照组和模型组加入化合物溶剂对照(10 μ?/well)。继续孵育2h后，在给药组与模型组中分别加入A β 25-35 (10 μ?/well)，终浓度为 10 Mmol/L。继续培养 24h 后，加入 5 mg/ml MTT (10μ1/well)，进行活细胞染色。孵育3h后，弃去培养液，加入100% DMSO (ΙΟΟμΙ/well)，并在摇板机上振摇使之充分溶解。490 nm的波长下测定各组的OD值。 [0027]2.3东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍实验 2.3.1被动躲避实验 2.3.1.1实验分组 将小鼠随机分成五组:设正常组(n=10)，模型组(n=18)，药材提取物组(25、50、100mg/kg) (n=10)及石杉碱甲组(n=10)。 [0028]2.3.1.2 实验方法 避暗仪器是利用小鼠嗜暗的习性设计一个装置，一半是暗室，一半是明室，中间有一小洞相连。暗室底部铺有通电的铜栅，并与一计时器相连，计时器可自动记录潜伏期的时间。小鼠进入暗室即受到电击，计时自动停止。根据Jung-Hwa YANG等人的实验方法[15，16]，进行了部分改进:实验开始前将小鼠转移至实验环境并适应至少30min，然后将小鼠分别置于明室中，1s后小门开启，小鼠通过小门进入暗室，记录各小鼠进入暗室的潜伏期，在小门开启10s以后才进入暗室的小鼠剔除实验组。适应完成后，口服给予药物组小鼠相应药物，而正常组及模型组给予相应量的溶剂。40min后腹腔给予东莨菪碱4.5 mg/kg (空白对照组给相同量的生理盐水)，作用20min后，将小鼠放入明室中适应1s后小门自动开启，动物通过洞口进入暗室受到电击(电流强度:0.45mA、电击时间:3s)。电击停止20s后将小鼠从暗室内取出，并记录每鼠从放入明室至进入暗室遇到电击所需时间，此即潜伏期。Imin后重复一次上述操作。24h后重做测验，记录每鼠从放入明室至进入暗室的时间，若180s仍未进入暗室则取出小鼠潜伏期记录为180s。 [0029]2.3.2 Y迷宫实验 2.3.2.1实验分组 将小鼠随机分成五组:设正常组(n=15)，模型组(n=20)，药材提取物组(25、50、100、200mg/kg) (n=8)及石杉碱甲组(n=10)。 [0030]2.3.2.2 实验步骤 根据Jung-Hwa YANG等人的实验方法[15，17],进行了部分改进:Y迷宫装置是由三个互成120°夹角的黑色聚酯材质的臂组合而成。小鼠最初被放置在任意一臂，记录小鼠探索各个臂的次序(即ABCAB等)。连续三次进入不同的臂则被定义为一次正确穿梭(即ABC，CAB或BCA)，并根据以下公式来计算正确穿梭次数的百分率:百分率(%) = (正确穿梭次数)/(总的穿梭次数)X 100%。实验开始时口服给予药物组小鼠相应药物，而正常组及模型组给予相应量的溶剂。40min后腹腔给予东莨菪碱4.5 mg/kg (空白对照组给相同量的生理盐水)，作用20min后,将小鼠由起始臂放入,小鼠在3个臂中自由活动8min。记录8min内每只小鼠在各个臂穿梭的次序并分别计算出5min及Smin内小鼠正确穿梭次数的百分率。 [0031]2.4统计方法 数据采用mean 土 SD表示,数据统计分析均在GraphPad Prism 5软件中进行,采用方差分析。P < 0.05组间有显著性差异。 [0032]3 结果 3.1细胞存活率比较 表I A β 25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤实验细胞存活率比较 【权利要求】 1.一种防治老年痴呆的中药组合物，其特征在于，包括以下组分且各组分的重量份数为: 何首乌15-25份； 天麻15-25份； 当归8-15份； 赤芍8-15份。 2.根据权利要求1所述的一种防治老年痴呆的中药组合物，其特征在于，包括以下组分且各组分的重量份数为: 何首乌17-20份； 天麻17-20份； 当归10-12份； 赤芍10-12份。 3.一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)提取:将何首乌、天麻、当归、赤芍按照重量份数比称取后，将原料切片或粉碎，然后洗净，向原料中加入溶剂，所述的溶剂的加入体积与原料总质量的比值为(5?12):1，然后通过加热回流提取，提取次数为I?3次，合并提取液； (2)制备中药组合物:将步骤(I)得到的提取液在60?75°C的温度条件下减压蒸馏回收溶剂，并将提取液浓缩至浸膏状态，所述的浸膏的相对密度为1.1?1.3，然后将浸膏在65?75°C的温度条件下减压干燥，然后粉碎过40?100目筛后得到中药组合物。 4.根据权利要求3所述的一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤(I)中所述的溶剂为水或乙醇。 5.根据权利要求3所述的一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤(I)中所述的溶剂为乙醇。 6.根据权利要求4或5所述的一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述的乙醇的浓度为50?95%。 7.根据权利要求4或5所述的一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述的乙醇的浓度为80%。 8.根据权利要求3所述的一种防治老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述的溶剂的加入体积与原料总质量的比值为6:1。 9.权利要求1所述的中药组合物用于制备防治老年痴呆的药物。 10.根据权利权利9所述的中药组合物用于制备防治老年痴呆的药物，其特征在于，还包括辅料，且所述的药物的剂型为丸剂、片剂、胶囊剂中的任一种。 【文档编号】A61K36/8988GK104173778SQ201410473797 【公开日】2014年12月3日 申请日期:2014年9月17日 优先权日:2014年9月17日
【发明者】金显友, 杨永安, 钟慧, 魏元刚, 朱海亮 申请人:江苏天晟药业有限公司