想通过酵母单杂交筛选上游调控因子,该如何选择单杂交诱饵序列呢?选了启动子后,但是启动子上元件很多,如何查询元件功能,选择关键motif?
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酵母单杂交诱饵选择方法(Y1HGold-pAbAi系统)
1. 启动子片段形式:选择感兴趣元件比较集中的区域(建议200-300bp左右);
2. motif形式:选择感兴趣motif进行串联。
注意事项:插入序列中不要同时含有BstbI/BbsI
02
常用的启动子预测软件
(Plantcare顺式作用元件预测结果示例)
(NEW PLACE顺式作用元件预测结果示例)
温馨提示:由于不同建库材料基因表达的时空特异性差异,以及转录因子在总转录水平中的占比较低(约3-5%),推荐所研究的诱饵与建库取材的表达谱相匹配,更有助于通过单杂交技术筛选上游调控因子。
水稻/拟南芥转录因子家族文库筛选
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